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      多肽合成與修飾技術服務

      多肽合成與修飾技術服務

      產品型號:

      所屬分類:蛋白質組學實驗

      產品時間:2022-05-18

      簡要描述:提供商: 上海研謹生物
      服務名稱: 多肽合成與修飾技術服務
      規格: 實驗服務
      價格: 500元

      詳細說明:

      實驗技術簡介:多肽合成是一個固相合成順序一 般從C端 (羧基端)向N端(氨基端)合成。過去的多肽合成是在溶液中進行的稱為液相合成法。從1963年Merrifield發展成功了固相多肽合成方法以來,經過不斷的改進和完善,到今天固相法已成為多肽和蛋白質合成中的一個常用技術,表現出了經典液相合成法*的優點,從而大大的減輕了每步產品提純的難度。多肽合成總的來說分成兩種:固相合成和液相多肽合成。

      實驗技術原理:

      多肽合成儀以固相合成為反應原理,在密閉的防爆玻璃反應器中使氨基酸按照已知順序(序列,一般從C端-羧基端向N端-氨基端)不斷添加、反應、合成,操作終得到多肽載體。固相合成法,大大的減輕了每步產品提純的難度。為了防止副反應的發生,參加反應的氨基酸的側鏈都是保護的。羧基端是游離的,并且在反應之前必須活化。

       

      實驗操作流程:

      1、去保護: Fmoc保護的柱子和單體必須用-種堿性溶劑(piperidine) 去除氨基的保護基團。

      2、激活和交聯:下一個氨基酸的羧基被一種活化劑所活化。 活化的單體與游離的氨基反應交聯,形成肽

      鍵。在此步驟使用大量的超濃度試劑驅使反應完成。循環:這兩步反應反復循環直到合成完成。

      3、洗脫和脫保護:多肽從柱上洗脫下來,其保護基團被一種脫保護劑 (TFA)洗脫和脫保護。

      多肽修飾類型:

      1、C端標記技術:

      C端酰胺化(Amidation,C-termainal)

      醛基化(Aldehydes) 、醇基化(Alcohols) 、pNA (P-Nitroanilide)

      AMC、AFC、巰基乙胺化(Cysteamide) 、酯基化(Ester) 、N-烷基化(N-AlkyI Amides)等

      2、N端標記技術:

      乙?;疉cetylated (Acetylated) 、Palmytolyl、 HYNIC、 生物素標記(Biotinylated)、 Br乙?;?Bromoacetylated)

      螯合反應(DOTA, DTPA conjugated)、甲醛化(Formylated)、十四烷基、 十八烷基化(Myristoylated)琥珀?;?、棕櫚酸化、蘋果酸化、脂肪酸化等(Succinylated)

      3、熒光標記修飾:

      C端修飾: AFC, AMC, Dap(Dnp), Lys(Dye), pNA, Rh110

      N端修飾: Bodipy-FL, Cy3, Cy5, Texas Red, 5-Tamra, 5-odoacetamido fluoresceinRhodamine 110 and Rhodamine B Luciferin, EDANS

      FAM, FITC, MCA, Rox, Sulforhodamine 101, 5-TAMRA

      4、環化反應:

      首尾成環,中間成環,特殊成環(N -> C or Head to Tail)

      2對二_硫鍵,3對二 硫鍵(Disulfide (S-S bond formation) .Triulide formation)天然產物活性肽成環(Cyclic-natural peptides )

      5、甲基化修飾:

      側鏈甲基化Lys(For),LysS(Me), Lys(Me)2, Lys(Me)3, Arg(Me)2 symmetrical, D-Tyr(Me),D-Tyr(Et)N端甲基化(N-Me Arg,N-Me-Asp, N-Me-Glu, N-Me-Leu, N-Me-Nle, N-Me-Nva, N-Me-Phe, N-Me-S N-

      Me-Ser, N-Me-Trp, N-Me-Thr, N-Me-Val)

      6、幾種特殊修飾:

      各種偶聯(BSA, KL H conjugated peptides for antibody production )、磷酸化 (Phosphoserine,Phosphothreonine, Phosphotyrosine)、磺化 (Sulfated Tyrosine or Serine)、MAPS (MultipleAntigenic Peptide)、糖肽(Glycopeptides)PEG修飾(PEGylation)

      實驗注意事項:

      客戶提供:

      1、多肽序列、數量、純度及特殊要求

      2、凍干多肽可在-20度保存或室溫保存

      3、溶液肽遠比凍干形式不穩定,溶液應為中性PH (5-7) -20度保存。

      4、為避免樣品的反復凍融,hao分成小樣存放。

      交付標準:

      臺成多肽、數據.

      其他:

      大多數多肽的首xuan溶劑是超純抽氣水,稀Z酸或氨水分別對堿性或酸性多肽的溶解也有幫助。如果這些方法用過后還不溶解的多肽,建議用DMF,脲,guanidiniam,chloride ,acetonitnle來溶解

       

       

       

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